super fluor 647 se -九游会ag

super fluor 488，555, 647, 680, 750 se活化酯标记抗体

1.产品简介  

super fluor 750 se=alexa fluor 750 se; super flour 系列（同alexa fluor 系列）荧光探针，具有更强的荧光强度，更广的ph应用范围（ph 4～10）, 更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代fitc,cy3, cy5, cy5.5, cy7等荧光染料。 

表 super fluor 488，555, 647, 680, 750活化酯的性质参数

2. super fluor 标记抗体的参考方案：

1) 蛋白溶解：用0.1 m nahco₃溶解至终浓度为2mg/ml

   将1ml 去离子水加入84mgnahco₃瓶中，配成1m 的碳酸氢钠溶液。振荡或吹打至完全溶解。该溶液ph 约8.3，2～6℃保存可用2 星期；若抗体是溶液，将抗体稀释至2mg/ml，再加入1/10 体积的上述碳酸氢钠溶液；若抗体是冻干粉，将1m 碳酸氢钠溶液用10 倍去离子水稀释成0.1m 后，用其将抗体溶成2mg/ml的溶液；

2）染料溶解：活化super flour se染料固体粉末从冰箱放入干燥器中慢慢升至常温后，用无水dmso将染料配置浓度为1 mg/ml。

3）标记：在1ml蛋白溶液中缓慢加入适量染料溶液，（蛋白:染料摩尔比=1:20～50；质量比可在以下范围内优化10～200ug super flour se 每毫克igg抗体）。同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。也可以直接将蛋白溶液直接加入染料的固体粉末的试剂瓶中，同时在暗处常温缓慢搅拌1小时。

4）纯化：用透析法或者葡聚糖sephadex纯化产品后，产品冷冻干燥成粉末或在0.01 m pbs/2mm叠氮化钠溶液中，-20℃避光储存。

5）贮存：标记好的蛋白贮存于2～6℃，避光。若纯化的蛋白偶联物浓度小于1mg/ml，加入bsa 或其他稳定蛋白1～10mg/ml。在2mm 叠氮钠存在的情况下，2～6 度可保存几个月。保存更长时间，则需分装后-20℃保存。避免反复冻融，避光保存。

3.计算标记比例f/p值：

对于igg 等大多数抗体来说，摩尔吸光系数为203000，f/p值在4～9 之间是最合适。

super flour 647标记蛋白f/p值计算：

1）用pbs 精确倍数稀释定量的少许纯化过的偶联蛋白，在1cm比色皿中测定280nm和650nm的光吸收；

2）计算样品中的蛋白浓度：蛋白摩尔浓度=(a₂₈₀-(a₆₅₀×0.03))×稀释倍数/203000

3）计算标记比例：每摩尔蛋白结合的染料摩尔数=a₆₅₀×稀释倍数/(239000×蛋白摩尔浓度)

4. 活性染料稳定性与储存：

 请注意：未开封的粉末在避光干燥-20℃可存放6月。其水溶液现配现用不能储存。任何溶解后的染料最好立即使用；无水的dmso溶液-20°c保存最多2个星期。