本品用dmso溶解,因dmso的熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。
dufinder 是一种新型核酸染料,具有安全、灵敏等突出优点,可以代替溴化乙锭(eb)作为各种核酸电泳的染色剂。与强致癌性的eb不同,dufinder 属于花箐类染料,毒性很低,使用安全,可有效保护实验操作者和环境。
dufinder 与dsdna 结合荧光信号可增强800~1000倍,其检测核酸的灵敏度比eb染色法平均高10倍左右。
dufinder 染料最大吸收峰为470nm,与该染料结合的核酸呈现绿色荧光。用可见光凝胶透射仪观测。也可用紫外凝胶透射仪观测,但效果稍差。
l 安全:dufinder 染料为花箐类染料,其致突变性远低于eb数倍甚至数十倍。
l 灵敏: 检测核酸的灵敏度平均高于eb染色法10倍左右。
l 经济: 价格低于进口同类产品5~10倍。
l 操作简单: 本染料有多种使用方法,操作简单 。
l 通用性: 适用于多种核酸电泳分析。可以对dna、rna、及寡核苷酸等进行染色。
l 兼容性: 对常用酶(如:taq 酶、逆转录酶、内切酶、连接酶等)没有抑制作用。
方法一:胶染法(用法同eb)(推荐方法)
(1) 制胶时加入dufinder 核酸染料。(例如:每50ml 琼脂糖溶液中加入5μl dufinder 10,000× 储液,以此比例类推)。
(2) 按照常规方法进行电泳。
u 此方法染色染料用量相对较少。500 μl染料大约可以做100块 50ml的胶。
方法二:泡染法
(1) 按照常规方法进行电泳。
(2) 用ph 7.0~8.5 的缓冲液(如:tae,tbe 或 te),按照10000:1(或10000:2)的比例稀释dufinder染料浓缩液,混匀,制成染色溶液,。
(3) 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10~45分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。凝胶越厚、浓度越高,所需染色时间越长。也可以在聚丙烯酰胺凝胶上直接染色(玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理,避免染料吸附在玻璃表面上)。将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色10~30分钟。
(4) 观测。
1. 该染料为花箐类染料,没有致癌性,但有可能会刺激皮肤和眼睛,操作时应戴手套。
2. 染料从冰箱中取出后应恢复至室温,使溶液充分融化,并混匀。
3. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,dufinder可以全部从双链核酸上去掉。
4. dufinder对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
5. 储存:储存于4℃,有效期至少一年。
6. 本品仅供科研使用。
name | dufinder核酸染料(10,000× dmso溶液) | ||
---|---|---|---|
cat# | 039-500ul | cas# | n/a |
storage# | 4°c干燥避光 | shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 508 | em(nm)# | 533 |
mw# | n/a | solvent# | dmso |
name | dufinder核酸染料(10,000× dmso溶液) |
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cat# | 039-500ul |
cas# | n/a |
storage# | 4°c干燥避光 |
shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 508 |
em(nm)# | 533 |
mw# | n/a |
solvent# | dmso |