fitc
cas#:3326-32-7
中文名:异硫氰酸荧光素
英文名:5-fitc;5-flourescein iso-thiocyanate;fitc 'isomer i' [5-fitc; fluorescein-5-isothiocyanate]
结构式:
分子式:c21h11no5s
分子量:389.38
性质:
1. 外观:黄色粉末
2. 纯度:≥95% (hplc)
3. 产品描述:
fitc能和各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中具有强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。用于医学,农学和畜牧等方面,可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。
4. fitc标记抗体流程:
(1) 将待交联的蛋白(浓度³1mg/ml)对交联反应液透析三次4℃,至ph=9.0。交联反应液配制方法:7.56g nahco3,1.06g na2co3,7.36g nacl,加水定容至1 l。
(2) 将fitc溶于dmso中,浓度为1mg/ml。每次交联使用的fitc均应新鲜配制,避光。
(3) 按p:f(蛋白质:fitc)=1mg:150μg 的比例将fitc缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,暗处4℃反应8h。
(4) 加入5mol/l的nh4cl至终浓度50mmol/l,4℃终止反应2h。
(5) 将交联物在pbs中透析四次以上,至透析液清亮。
(6) 交联物的鉴定
蛋白浓度(mg/ml) = [ a280– 0.31×a495 ] / 1.4
f/p比例: 3.1×a495 / [a280 – 0.31×a495 ],该值应介于2.5~6.5之间。
(7) fitc交联的蛋白应置于ph 7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1% nan3、1% bsa,4℃避光保存。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
name | 5-异硫氰酸荧光素(5-fitc) | ||
---|---|---|---|
cat# | 120-100mg;120-1g | cas# | 3326-32-7 |
storage# | −20°c干燥避光 | shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 494 | em(nm)# | 520 |
mw# | 389.38 | solvent# | dmso |
name | 5-异硫氰酸荧光素(5-fitc) |
---|---|
cat# | 120-100mg;120-1g |
cas# | 3326-32-7 |
storage# | −20°c干燥避光 |
shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 494 |
em(nm)# | 520 |
mw# | 389.38 |
solvent# | dmso |