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calcein, am

cas#：148504-34-1

中文名：3'-o-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基荧光素,二乙酰甲酯

英文名：3',6'-di(o-acetyl)-4',5'-bis[n,n-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester

别名：钙黄绿素乙酰甲酯

结构式：

分子式：c₄₆h₄₆n₂o₂₃

分子量：994.86

性质：

1. 外观：白色或浅黄色晶体

2. 纯度：≥90%（hplc）

3. 产品描述：

calcein, am是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成calcein，从而被滞留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如bcecf, am和cfda）相比，calcein, am的细胞毒性很低。calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。

calcein, am仅对活细胞染色。作为核染色染料的pi不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的dna双螺旋从而产生红色荧光（激发：535 nm，发射：617 nm），因此pi仅对死细胞染色。由于calcein和pi-dna都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用545 nm激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，calcein, am和pi经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。

由于不同细胞系的最佳染色条件不同，我们建议个别确定calcein, am和pi的合适浓度。

4. 使用方法                                                                              

（1）用dmso制备1 mm 的calcein, am溶液，并用pbs将其稀释制成1～50 μm的calcein, am溶液。
（2）将1/10细胞培养基体积的calcein, am溶液加入到细胞培养基中。^b)
（3）在37℃培养细胞15～30分钟。
（4）用pbs或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
（5）用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a)  如果calcein, am很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如pluronic f127。
b) 也可以用1/10浓度的calcein, am溶液代替培养基。

储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

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