hoechst 33258染色液
中文名:二苯甲亚胺, 三氯化氢2'-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1h-苯并咪唑
英文名:2’-(4-hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1h-benzimidazole, trihydrochloride
别名:hoechst 33258,bisbenzimide h 33258,hoe 33258bisbenzimide h 33258或hoe 33258
结构式:
性质:1. 外观:黄色粉末 2. 纯度:≥99%(hplc)超纯级;cas#:23491-45-4; 分子式:c25h24n6o · 3hcl; 分子量:533.88
产品描述:
hoechst染料是一类在显微观察中标记dna的荧光染料。因为这类荧光染料能标记dna,所以它们也经常用于细胞核和线粒体的显像观察。这类染料中两个相关的染料hoechst 33258和hoechst 33342经常使用。这两种染料都在紫外光下350nm处被激发,都在461nm处最大发射光附近发射蓝/青色荧光。hoechst染料可以用于活细胞或者固定化细胞,并且经常用来代替其它核酸染料如dapi。这两种染料关键的不同点在于,hoechst 33342加有乙基,这使它具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜。在一些实验中,hoechst 33258的渗透性明显比hoechst 33342要弱些。这些染料也可以用来检测样品中的dna含量,通过绘制发射光强度与dna含量的标准曲线。
hoechst 33258是一种可透过细胞膜并对dna染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链dna后释放强烈的蓝色荧光。hoechst 33258常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。hoechst 33258-dna的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。
使用方法:
1、对于固定的细胞或组织:
1.1 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的hoechst 33258染色。
1.2 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,并混匀。室温放置3-5分钟。
1.3 吸除hoechst 33258染色液,用tbst 、pbs或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
1.4 直接在荧光显微镜下或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织:
2.1 加入适当量hoechst 33258染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96 孔板一个孔需加入100微升染色液。
2.2 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用pbs或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
储存条件:-20℃避光保存,有效期一年。
注意事项:
1)hoechst 33258对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
name | hoechst 33258染色液,ultrapure 超纯级 | ||
---|---|---|---|
cat# | 17520 | cas# | 23491-45-4 |
storage# | −20°c干燥避光 | shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 352 | em(nm)# | 461 |
mw# | 533.88 | solvent# | water |
name | hoechst 33258染色液,ultrapure 超纯级 |
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cas# | 23491-45-4 |
storage# | −20°c干燥避光 |
shelf life# | 12个月 |
ex(nm)# | 352 |
em(nm)# | 461 |
mw# | 533.88 |
solvent# | water |